1. Metóda identifikácie tenkej vrstvy
Vezmite 0,5 g prášku z liečivých epimédií alebo príslušného množstva extraktu, pridajte 10 ml etanolu, ponorte 30 minút, prefiltrujte a filtrát odparte. Pridajte 1 ml etanolu na rozpustenie zvyšku, ktorým je testovací roztok. Referenčná látka icariínu bola odvážená, rozpustená v metanole a zriedená na 0,1 mg / ml, čo je referenčný roztok. Napipetujte 10 μl každého testovaného roztoku a referenčného roztoku na silikagél H tenkovrstvovú dosku rovnakej sodnej soli karboxymetylcelulózy ako spojivo s etylacetát-butanón-kyselina mravčia-voda (10: 1: 1 : 1) ako rozvíjajúce činidlo, rozvinuté, odobrané, vysušené na vzduchu a umiestnené do UV lampy (365 nm) na vyšetrenie. Na chromatograme skúšobnej vzorky sa na pozícii zodpovedajúcej chromatogramu referenčnej látky uvedie rovnaká tmavočervená škvrna; postriekané trichlórovaním Hliníkový testovací roztok bol opätovne aplikovaný UV lampou (365 nm), aby sa odhalil ten istý oranžovo-červený fluorescenčný bod.
2. Spektrofotometrické stanovenie celkových flavonoidov v Epimediu a jeho extraktoch
Referenčný výrobok icariin bol presne odvážený a formulovaný do štandardného roztoku s metanolom (10 ug / ml). Presne navážte množstvo práškového produktu (zodpovedá približne 1 mg ikariínu), sonikujte s metanolom 25 ml 30 minút, zrieďte do 50 ml odmernej banky a prefiltrujte 0,45 μm mikroporéznou membránou, čo je test produktu. Skúšobný roztok a referenčný roztok sa odobrali oddelene a absorbancia sa merala pri vlnovej dĺžke 270 nm s činidlom ako slepý pokus a výpočet sa získal.
3. Stanovenie icariínu v Epimediu a jeho extrakte pomocou HPLC
Chromatografické podmienky a test vhodnosti systému: kolóna ODS2 5u C18 (4 mm × 150 mm); mobilná fáza: acetonitril-voda (30:70); detekčná vlnová dĺžka: 270 nm; prietoková rýchlosť: 0,8 ml / min. Počet teoretických dosiek nie je nižší ako 1500 na základe icariinu.
Príprava referenčného roztoku: Referenčný výrobok icariin bol presne odvážený a bol pripravený roztok 0,1 mg / ml s metanolom.
Príprava testovacieho roztoku: presne navážte príslušné množstvo práškového produktu (zodpovedá približne 1 mg icariínu), sonikujte metanolom 25 ml 30 minút, zriedte do 50 ml odmernej banky, použite mikroporézny filter 0,45 μm. Membránová filtrácia je skúšobný roztok.
Metóda testu: 10 μl každého roztoku vzorky a referenčného roztoku sa vstreklo do nástroja HPLC a plocha sa vypočítala externým štandardným spôsobom.